先進奈米生醫平台技術
外泌體(胞外體)一站式實驗平台服務
Exosome/EVs Outsourcing Service
Extracellular Vesicles, EVs-胞外體(細胞外囊泡)是近期醫學、生科、生化等相關研究領域的熱門主題之一, 其含義包括(但不限於): Exosome外泌體, Microvesicles微囊泡, Apoptoticbody凋亡小體, Large oncosomes腫瘤小泡等分類, 依照粒徑或所帶標記物的不同而定。
Exosome外泌體是由多泡體與細胞膜融合後,釋放到細胞外的,直徑介於30-150nm的膜性小囊泡,是細胞間通訊的載體。有關外泌體的分離,不同的分離方法各有利弊,目前並沒有單一的最優方法來分離獲得純淨的外泌體,因而方法的選擇取決於下游的應用及需要解決的科學問題。
在符合國際細胞外囊泡協會(ISEV)最新在“2023細胞外囊泡研究基本實驗要求(MISEV2023)”中把胞外體(含外泌體)的分離純化方法分為以下4個層面:
高回收率, 低特異性
中等回收率, 中等特異性
低回收率, 高特異性
高回收率, 高特異性
NDT台灣諾曼達科技使用最具代表性的SEC (Size Exclusion Chromotagraphy) 尺寸排阻色譜法管柱, 其管柱不僅有20nm, 35nm和70nm三種孔徑可選並符合ISO13485:2016規範, 更推出了GMP-ready的qEV column, 搭配周邊配套的全球唯一AFC-V2(自動餾份收集機)與qEV Zenco(自動色譜系統), 達到最大的標準化+規模化程序, 得到TSEV台灣胞外體學會特別指名推薦。
儘管已知Exosome, EVs對於各種生物醫學相關應用具有巨大的潛力, 然而各單位卻受限於資源有限而無法拓展其研究、開發、驗證或大尺度的生產純化, 台灣諾曼達科技於國內首創最完整、專業、齊全的外泌體(胞外體)一站式服務方案, 可協助客戶開創或擴充相關的研究量能; 可接受的樣品來源廣泛, 包含血漿、血清、尿液、唾液、腹水、膽汁、胸水、細胞上清液、精液、腦脊髓液、組織或植物樣本等。
服務的項目:
台灣諾曼達科技公司出具含實驗方式(Method)、操作過程(Process)與各項結果(Results)的整體報告, 僅供研究使用。
更多的相關訊息, 歡迎和我們聯絡或來信洽詢: info@chengyitech.com.tw
外泌體(胞外體)純化鑑定服務
Size Exclusion Chromatography (SEC) 尺寸排阻色譜法被MISEV最新指南歸為回收、純度皆適中的純化分類; 以自然滴落的方式區分EVs fractions與Protein fractions, IZON (GMP-ready) qEV column 搭配 AFC-V2 或qEV Zenco 可自動操作達成標準化、大規模的純化過程。
服務特點
通過 ISO 13485:2016 認證。
樣品進樣體積範圍: 150 µL-100 mL, 100 - 2700 mL (如為細胞上清液、尿液或乳液等大體積樣本可先進行100 kDa超濾濃縮20x-200x倍率, 原樣體積最大可至185 L/批次)。
可選擇20nm孔徑(exosomer, supermere, 20-100nm)、35nm孔徑(sEV, 35-350nm)或70nm孔徑(EVs, 70-1000nm)之qEV column, 是最自然且完整保留外泌體顆粒的方式。
自動SEC column分離純化
得到高純度與完整原始狀態的外泌體粒子
從復合的生物樣品中純化(提取)出外泌體粒子, 是證明研究的第一步也是最關鍵的程序, 不只可以證明外泌體的價值, 也可避免除了外泌體的外來物質干擾(主要為雜蛋白、脂蛋白等)。
個體表徵
粒徑、數量濃度與Zeta電位檢測
粒徑、數量濃度與Zeta電位分析是從整體上對外泌體顆粒的分佈情況進行檢測,三者缺一不可,是對現有外泌體鑒定方法的必要數據。
總體表徵
蛋白鑑定
測定EVs fractions與Protein fractions所含的蛋白濃度, 代表的是外泌體純度的關鍵證據。
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外泌體(胞外體)組學和驗證服務
根據國際細胞外囊泡協會的規範, 外泌體的組學可分為蛋白與核酸兩種。
經由 SEC 方式(自動化; 標準化)純化而得的外泌體組分, 稱為Exosome(EVs) fractions, 合併後經由"濃縮"體積將濃度提升以進行後續的蛋白驗證, 並經由特異性的RNA萃取以進行後續的核酸驗證-
Western Blot 西方墨點法
應用Western Blot對Exosome/EVs的陽性標誌物和陰性標誌物進行表徵。其中包括至少3個陽性(至少包括1個跨膜蛋白和1個細胞溶質蛋白)、1個陰性蛋白質標誌物。
外泌體-RNA分析
RT-qPCR驗證miRNA和mRNA目標物
外泌體miRNA測序
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